《第三十七章 生殖道标本的细菌学检验》复习
- 2026-09-25 17:22:56
第一节 标本采集、运送和验收
一、采集指征
怀疑生殖道感染：尿道炎、阴道炎、宫颈炎、盆腔炎、生殖器溃疡、淋病等，出现分泌物异常、疼痛、溃疡、水疱皮疹等，采集生殖道标本送检。
孕妇特殊筛查：孕 36 周‑37 周 B 群链球菌（无乳链球菌）筛查；孕期还可针对 HIV、梅毒螺旋体、HBV、HCV、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、风疹病毒、弓形虫开展血清学 / 分子检测。
二、标本的采集
⚠️重点：采集原则：避免外阴阴道正常菌群污染，尽量采集病灶部位，严格无菌操作；优先液体 / 组织标本，拭子为次选方式
1. 尿道分泌物
￮ 男性：排尿后采集，先用生理盐水清洁尿道口。拭子插入尿道 2‑4cm，旋转停留 20s 取出。
￮ 怀疑淋病奈瑟菌：不要尿液冲刷，直接取分泌物。
2. 生殖道溃疡标本：无菌生理盐水清除溃疡表面脓液，取溃疡基底部渗出物。
3. 宫颈标本：怀疑宫腔感染，不要采集宫颈分泌物，避免阴道菌群污染；去除宫颈口分泌物，拭子伸入宫颈管 1‑2cm，转动停留 10‑30s 取出。
4. 阴道标本：先清除阴道表面分泌物，取阴道后穹窿分泌物；
B 群链球菌筛查窗口期：孕 36 周～37 周，采集阴道下 1/3 + 直肠拭子（同一根拭子完成两处采样，不需要窥器），做选择性增菌培养 / 分子检测。
5. 子宫内膜标本：清除阴道宫颈分泌物，双腔真空吸引器或者拭子取材。
子宫内膜、羊水、后穹窿穿刺液做厌氧菌培养：拒收拭子标本，必须液体 / 组织，厌氧转运容器，标本≥1 mL。
6. 输卵管标本：腹腔镜 / 剖宫产手术下，拭子插入输卵管采集。
7. 羊水标本：羊膜腔穿刺采集。
8. 前列腺液：排尿冲洗尿道口，按摩前列腺采集，无菌容器送检。
9. 精液：禁欲 5 天以上，手淫法采集，无菌容器送检。
10. 组织标本：组织研磨制成混悬液接种。
✅高频考点：拭子采集：一般采集 2 支，一支涂片镜检，一支用于培养；拭子吸取标本≥1μL；重复采集频率不超过每日 1 次；采集前尽量避免抗菌药物使用。淋病奈瑟菌、苛养细菌：禁用藻酸钙拭子；优先涤纶 / 聚酯纤维（植绒拭子）；棉拭子仅适合支原体，不适合苛养菌、衣原体、淋病奈瑟菌。
不适合厌氧菌培养的生殖道标本：会阴拭子、宫颈分泌物、阴道 / 外阴分泌物、恶露、前列腺液、精液、尿道分泌物，以上标本申请厌氧菌培养应当拒收；
生殖道可做厌氧菌培养仅为：后穹窿穿刺液、输卵管组织 / 抽吸物、剖宫产胎盘组织、前庭大腺抽吸物，必须注射器抽取 / 组织，不能拭子。
三、标本的运送
1. 标本采集后尽快送检，室温送检≤2 h；夏季时间进一步缩短；生殖道拭子标本室温最长可保存 24 h（转运培养基条件下）。
2. 淋病奈瑟菌：床边接种，置于 5% CO₂环境；无床边接种用Stuart 或者 Amies 转运培养基。
生殖道标本（怀疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌）严禁冷藏（2‑8℃），禁止冷冻！低温会杀灭苛养菌；全程室温转运；只有分子检测标本才可以冷藏。
4. 不要用含甲醛等有毒保存液，会杀灭细菌。
5. 怀疑厌氧菌感染：只有后穹窿穿刺液、输卵管、羊水等穿刺 / 手术标本使用厌氧运送培养基；宫颈、阴道、尿道拭子不做厌氧培养；标本量＜1 mL 的生殖道无菌穿刺标本，30 min 内送达实验室，尽量隔绝空气。
四、标本的验收
1. 容器：无菌、密闭、无渗漏，无破损。
2. 标签验收：姓名、年龄、性别、标本类型、住院号、标本采集日期时间等信息完整；标签贴容器外壁，不要贴盖子。
3. 标本质量：标本量充足；拭子标本注意拭子头部是否干燥，干燥标本拒收。4.申请厌氧菌培养，但送检标本为宫颈 / 阴道 / 尿道 / 前列腺拭子，直接拒收厌氧菌培养申请，可做普通需氧培养。
第二节 细菌学检验
一、检验程序
生殖道标本→直接涂片（革兰染色、抗酸染色）→初级报告；同时接种培养基进行培养
• 需氧培养：血平板、巧克力、中国蓝 / 麦康凯，35℃，5% CO₂，24‑48h
• ⚠️重点：阴道、宫颈、尿道拭子不开展厌氧培养；仅穿刺 / 手术获取的生殖道无菌体液 / 组织做厌氧培养。
除血液外，拟做厌氧培养标本均应同步革兰染色镜检（艰难拟梭菌除外）。培养得到可疑菌落→生化反应、药敏试验→最终报告
二、检验方法
（一）标本的显微镜检查⭐⭐⭐
1. 革兰染色镜检观察
￮ 淋病奈瑟菌：白细胞内革兰阴性双球菌
￮ 杜克雷嗜血杆菌：细小革兰阴性球杆菌，链状 / 鱼群样排列
￮ 结核分枝杆菌：抗酸阳性杆菌
￮ 念珠菌：革兰阳性圆形 / 卵圆形芽生孢子、假菌丝
2. 阴道分泌物清洁度判定
💡：Ⅲ、Ⅳ 度提示阴道炎症；Ⅰ‑Ⅱ 度清洁度可出现在非细菌性阴道病。
（二）标本的培养和鉴定⭐⭐⭐
1. 淋病奈瑟菌
￮ 营养要求高，不能普通血平板培养；巧克力 / GC 培养基，35‑37℃，5%‑10% CO₂，70% 湿度，培养 24‑48h。
￮ 菌落：灰白色、半透明、光滑 1‑2mm；革兰阴性双球菌；氧化酶阳性。
2. 厌氧菌：仅后穹窿穿刺液、输卵管、胎盘等穿刺 / 手术标本才做厌氧培养；厌氧血琼脂平板，厌氧环境，48h，观察菌落形态。
3. 其他病原体：念珠菌、杜克雷嗜血杆菌、支原体、衣原体、滴虫等。
滴虫湿片观察：标本采集后尽快检测，超过 1h 建议改用核酸检测，活动滴虫会死亡。
第三节 报告与解释⭐⭐⭐
一、阳性结果报告
1. 显微镜结果
￮ 直接镜检：见到白细胞内革兰阴性双球菌，报告 “见到革兰阴性双球菌，位于白细胞内”；见到真菌孢子假菌丝报告 “查见革兰阳性芽生孢子及假菌丝”；怀疑结核报告 “找到抗酸杆菌”。
2. 培养结果
￮ 生殖道任何标本培养出淋病奈瑟菌、化脓链球菌、杜克雷嗜血杆菌、β 溶血链球菌，无论数量多少，均视为致病菌。
￮ 女性尿道、宫颈拭子检出XX 细菌生长，结合药敏；阴道加德纳菌在巧克力平板生长，仅大量生长才考虑细菌性阴道病。
￮ 金黄色葡萄球菌、肠杆菌科、厌氧菌：
宫颈、阴道、尿道拭子检出厌氧菌，不能报告厌氧菌感染，属于黏膜定植菌群；只有穿刺 / 手术无菌标本分离厌氧菌，才判定致病菌。
￮ 要结合临床表现、涂片，判断是致病菌还是优势定植菌群。
二、阴性结果报告
1. 显微镜阴性：未见白细胞内革兰阴性双球菌，未见真菌孢子。
2. 培养阴性：注意：培养时间不足不能报告阴性。
￮ 例：“未检出淋病奈瑟菌生长”；“未检出解脲脲原体生长”。
END
本文参考来源：
[1]刘运德,楼永良.临床微生物学检验技术[M].北京:人民卫生出版社,2015.ISBN 978-7-117-20281-7.全国高等学校医学检验专业第六轮暨医学检验技术专业第一轮规划教材,“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材.
[2] WS/T 640‑2026 临床微生物学检验标本的采集和转运标准 [S]. 北京：中华人民共和国国家卫生健康委员会，2026.
