《第三十章 其他病毒检验》复习

第一节 流行性乙型脑炎病毒（乙脑病毒）

1. 生物学特性

￮ 核酸：单股正链 RNA，有包膜；球形，30‑40nm，核衣壳 20 面体立体对称

￮ 传播媒介：三带喙库蚊；传染源：猪（最重要中间宿主 / 扩增宿主）；储存宿主：蚊虫

￮ 流行季节：夏秋季；侵犯中枢神经系统

2. 临床要点

￮ 隐性感染多见；少数发生脑炎；后遗症：精神障碍、运动障碍。儿童易感。

3. 微生物学检验⭐⭐⭐

乙脑早期诊断首选：IgM 抗体检测 / RT‑PCR；分离首选细胞 C6/36。

第二节 森林脑炎病毒

1. 生物学特性

￮ 单股正链 RNA，有包膜；球形 20‑30nm；蜱传病毒

￮ 传播媒介：森林硬蜱；储存宿主：啮齿动物、鸟类（野生啮齿动物不仅是储存宿主，有时也可作为传染源，如饮用未煮沸的生奶感染，虽罕见但有案例）

2. 临床：俄罗斯春夏脑炎；病死率 20‑30%；感染后持久免疫力。

3. 检验要点

￮ 标本：血液、脑组织；细胞分离 C6/36；血清学：IgM、双份血清 IgG4 倍升高。

第三节 登革病毒

1. 生物学特性⭐

￮ 单股正链 RNA，黄病毒科；4 个血清型（DENV-1~4，再次感染异型病毒时，发生 抗体依赖性增强 (ADE) 效应，导致重症登革热（DHF/DSS）的风险增加）；球形 37‑50nm，有包膜

￮ 传播媒介：伊蚊（埃及伊蚊、白纹伊蚊）；自然宿主：人、猴

2. 临床

￮ 登革热；登革出血热 / 登革休克综合征 (DHF/DSS)

3. 微生物学检验⭐⭐

￮ 标本：急性期血清

￮ 抗原检测：ELISA、免疫荧光查抗原；核酸 RT‑PCR 早期诊断（RT-PCR 和 IgM 捕获 ELISA 是首选诊断方法。）

￮ 病毒分离：C6/36 白纹伊蚊细胞（病毒分离不是临床快速诊断的首选手段，而是确诊的金标准之一，因其耗时较长）

￮ 血清学：IgM 提示近期感染；双份血清 IgG 效价≥4 倍增高有诊断意义。

第四节 出血热病毒

包含汉坦病毒、新疆出血热病毒等一大类，不同媒介。

1、汉坦病毒（肾综合征出血热）⭐⭐⭐

1）生物学特性

• 分节段单股负链 RNA；球形，平均 120nm；有包膜；宿主鼠类

• 汉坦病毒属：至少 23 个种；我国主要：汉滩病毒、汉城病毒。2）传播：鼠类排泄物气溶胶吸入为主要途径，不是虫媒！接触鼠类排泄物后的黏膜破损也是重要途径。

3）临床表现：肾综合征出血热（HFRS）；发热、出血、肾损害；三痛三红；病死率 5‑78%。4）微生物学检验

• 标本：血液，尸检肺组织

• 核酸：RT‑PCR 早期诊断

• 分离：BSL‑3 级实验室操作，VeroE6 细胞(临床不常规做病毒分离)

• 血清学：IgM 阳性提示现症感染；双份 IgG≥4 倍升高。

5）我国主要流行的是 汉滩病毒 (HTNV, I型) 和 汉城病毒 (SEOV, II型)。

· HTNV：病情较重，肾损害明显。

· SEOV：病情较轻，肺综合征少见。

2、新疆出血热病毒

• 媒介：硬蜱；单股正链 RNA；布尼亚病毒科；荒漠牧场；蜱叮咬传播。

第五节 狂犬病病毒⭐⭐⭐

1. 生物学特性

• 弹状病毒；单股负链 RNA；有包膜；大小 100‑300×60‑85nm

• 最重要特征：内基小体 (Negri body)：神经细胞质内嗜酸性包涵体，诊断价值。

注意：内基小体 (Negri bodies) 并非在所有病例中都出现（约70-80%），且蝙蝠来源的狂犬病毒可能不形成典型内基小体。因此，免疫荧光法检测抗原 比查内基小体更敏感、更特异。

2. 传染源：犬、猫、狼、蝙蝠；传播：咬伤抓伤；病死率几乎 100%。

3. 微生物学检验⭐重点

a. 标本：死者脑组织（海马回）；咬伤者唾液、脑脊液

b. 显微镜：查找内基小体（HE 染色）

c. 抗原检测：免疫荧光查脑组织病毒抗原（快速确诊）

d. 核酸 RT‑PCR；动物接种（小鼠）

e. 抗体：血清中和抗体 ≥0.5 IU/mL 视为阳性/有保护力

考点：可疑动物死亡，取海马回脑组织查内基小体；狂犬病无有效治疗，预防为主。

第六节 人乳头瘤病毒 HPV⭐⭐⭐

1. 生物学特性

• 双链环状 DNA 病毒；无包膜；20 面体；52‑55nm；不能体外细胞培养！

重要考点：HPV 无法体外人工培养，实验室依靠核酸检测。

分型与疾病

3. 微生物学检验

• 标本：病变部位黏膜组织

• 检验手段：核酸 PCR（金标准），分型鉴定；免疫方法查抗原。

• 无细胞分离培养。

🎯高频考点总结

1.传播媒介区分（必背）

· 蚊媒：乙脑（三带喙库蚊）、登革热（埃及伊蚊、白纹伊蚊）、寨卡（伊蚊）、黄热病（伊蚊）。

· 蜱媒：森林脑炎（全沟硬蜱）、新疆出血热（硬蜱）。

· 动物/接触传播：汉坦病毒（鼠类排泄物气溶胶/接触）、狂犬病（犬猫咬伤）、HPV（性接触/密切皮肤接触）。

2.病毒核酸类型与结构（必背）

· 单股正链 RNA (+ssRNA)：乙脑、登革、森林脑炎、寨卡、黄热、肠道病毒、丙肝、新冠。（特点：基因组可直接作为 mRNA，翻译出多聚蛋白前体）。

· 单股负链 RNA (-ssRNA)：汉坦病毒、狂犬病毒、流感病毒、副流感、麻疹、腮腺炎、埃博拉。（特点：自带 RNA 聚合酶，需转录成 +mRNA 才能翻译）。

· 双链 DNA (dsDNA)：HPV（无包膜，小分子）、HBV（部分双链，大分子）、EBV、CMV。

· 逆转录病毒：HIV（+ssRNA，但含逆转录酶）。

3.特征性诊断指标与方法

· 乙脑/登革/森林脑炎：IgM 捕获 ELISA 是早期诊断首选；RT-PCR 用于急性期。

· 汉坦病毒：IgM/IgG 间接 ELISA；RT-PCR；不做常规病毒分离。

· 狂犬病：直接免疫荧光法 (DFA) 检测脑组织抗原是金标准；HE 染色查内基小体（特异性高，敏感性略低）。

· HPV：核酸检测 (PCR/杂交) 是唯一可靠手段；不可用常规细胞培养分离。

4.关键数值记忆

· 血清学诊断通用标准：双份血清 IgG 效价 ≥4倍升高 有回顾性诊断意义。

· 狂犬病保护阈值：中和抗体 ≥0.5 IU/mL。

· 登革热分型：4 种血清型。

5.易混细胞系

· C6/36：伊蚊细胞，适合黄病毒科（乙脑、登革）分离。

· Vero E6 / BHK-21：非洲绿猴肾细胞/仓鼠肾细胞，广谱，可用于多种病毒，汉坦可用 Vero E6，狂犬可用 BHK-21 或神经母细胞瘤细胞。

· MDCK：狗肾细胞，专用于流感病毒分离。

本文参考来源：

[1]刘运德,楼永良.临床微生物学检验技术[M].北京:人民卫生出版社,2015.ISBN 978-7-117-20281-7.全国高等学校医学检验专业第六轮暨医学检验技术专业第一轮规划教材,“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材.